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A375細(xì)胞

2024-03-25

回顧小編培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程，其中小鼠的黑色素瘤細(xì)胞（B16）用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)會(huì)產(chǎn)生大量黑色素，使得其離心后離心管底部細(xì)胞呈黑色。那么現(xiàn)在小編就有疑問(wèn)了，人惡性黑色素瘤細(xì)胞（A375）會(huì)產(chǎn)生黑色素嗎？離心下來(lái)細(xì)胞顏色會(huì)是黑色的嗎？能做絡(luò)氨酸酶抑制實(shí)驗(yàn)嗎？

人惡性黑色素瘤細(xì)胞A-375 [A375]來(lái)源于一名罹患黑色素瘤的54歲女性的皮膚組織，是Giard DJ等人建立的一系列細(xì)胞株中的一株。該細(xì)胞在抗胸腺細(xì)胞球蛋白、血清處理的NIH Swiss小鼠中形成類似于惡性黑素瘤的快速增殖的皮下腫瘤。A-375細(xì)胞本身帶有BRAF Val600Glu (c.1799T>A)突變，是NRAS 突變-A375理想對(duì)照，可用于細(xì)胞三維培養(yǎng)、高通量篩選、毒理學(xué)和免疫腫瘤學(xué)研究，也是一種合適的轉(zhuǎn)染宿主。據(jù)報(bào)道，該細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)成瘤，也可以在成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層和瓊脂上形成克隆。

A375細(xì)胞簡(jiǎn)介：

中文名稱：人惡性黑色素瘤細(xì)胞

細(xì)胞簡(jiǎn)稱：A375

細(xì)胞形態(tài) ：上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞

組織來(lái)源：皮膚組織

換液頻率：2~3次/周

培養(yǎng)環(huán)境：95%空氣+5%CO2 在37℃培養(yǎng)

凍存條件：90% FBS+10% DMSO凍存于液氮

完全培養(yǎng)基：DMEM＋10% F B S＋1% P /S

A375細(xì)胞特點(diǎn)：

1、細(xì)胞顆粒感較重

細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞內(nèi)黑點(diǎn)及細(xì)胞外顆粒較多，建議使用優(yōu)質(zhì)血清及培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞；

2、傳代、復(fù)蘇注意細(xì)胞狀態(tài)

細(xì)胞消化或者復(fù)蘇操作不當(dāng)容易導(dǎo)致細(xì)胞死亡裂解產(chǎn)生大量碎片及顆粒，進(jìn)而影響活細(xì)胞狀態(tài)，注意消化或復(fù)蘇過(guò)程盡量輕柔，嚴(yán)格控制消化時(shí)間和復(fù)蘇操作規(guī)范，傳代或復(fù)蘇24h后建議觀察細(xì)胞，建議換液一次去除死亡細(xì)胞。

最后針對(duì)小編最初的疑問(wèn)，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間對(duì)人惡性黑色素瘤細(xì)胞培養(yǎng)，也得到了答案，在此小小的總結(jié)了一下。

人惡性黑色素瘤細(xì)胞（A375）會(huì)產(chǎn)生黑色素，但是離心下來(lái)細(xì)胞顏色會(huì)是白色，細(xì)胞內(nèi)的黑色顆粒是細(xì)胞外分泌泡及細(xì)胞器折光，這個(gè)屬于細(xì)胞自身特性，無(wú)法清除也無(wú)法改變，大部分細(xì)胞都會(huì)有這種現(xiàn)象，只是不同細(xì)胞顆粒多少有區(qū)別，細(xì)胞培養(yǎng)體系不適應(yīng)、營(yíng)養(yǎng)缺乏、滲透壓異常等均可能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)顆粒增加，建議使用合適的培養(yǎng)條件。最后查閱相關(guān)文獻(xiàn)資料得出該細(xì)胞能做絡(luò)氨酸酶抑制實(shí)驗(yàn)的結(jié)論[1]。

CELLImage 10X 鏡頭觀察：

1、A375細(xì)胞0h時(shí)序圖像