細(xì)胞培養(yǎng)是生物學(xué)研究中，一類重要的實(shí)驗(yàn)方法。細(xì)胞養(yǎng)不好，細(xì)胞生物學(xué)研究也就無從談起。影響細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)的因素有很多，細(xì)胞的密度，就是其中重要的一項(xiàng)。通常，細(xì)胞密度是指每單位面積或體積的細(xì)胞數(shù)。

那么在不同初始密度下接種的不同細(xì)胞分別有什么不一樣的變化呢？

 

    實(shí) 驗(yàn) 過 程    

將293T細(xì)胞、HELA細(xì)胞、B16細(xì)胞分別以初始密度1K/2K/5K/10K/15K/20K接種至24孔板中，用CELLImage Mini全自動活細(xì)胞成像儀對24孔板持續(xù)明場96小時監(jiān)測，分別間隔2小時采集一次圖像，在終點(diǎn)試驗(yàn)前檢查生長情況。隨著時間的推移，活細(xì)胞成像設(shè)備可以用來準(zhǔn)確地、無標(biāo)記的記錄細(xì)胞的形態(tài)變化和增殖變化，如圖所示。

 

 

 

    實(shí) 驗(yàn) 結(jié) 果    

通過CELLImage Mini全自動活細(xì)胞成像儀觀察比較三種不同細(xì)胞系中細(xì)胞播種密度依賴性增殖的變化，并且用儀器自帶的Readcells軟件AI智能算法對其分析定量生成生長曲線，如上圖顯示儀器可以有效的識別三種不同形態(tài)的細(xì)胞并計(jì)算生長面積，了解細(xì)胞播種差異對細(xì)胞增殖的影響對于控制試驗(yàn)變異因素是很重要的。另外，觀察三種細(xì)胞的增殖曲線變化，可以發(fā)現(xiàn)293T細(xì)胞增殖呈現(xiàn)異常，追溯此前的培養(yǎng)過程可能是由于細(xì)胞經(jīng)過長時間饑餓處理導(dǎo)致其狀態(tài)受到影響，進(jìn)而影響其傳代后的正常增殖過程。

細(xì)胞培養(yǎng)的適宜細(xì)胞密度取決于特定的細(xì)胞類型和培養(yǎng)目的。不同的細(xì)胞由于來源不同，特性也會有所不同，有的細(xì)胞比較依賴于高密度才能生長，所以在進(jìn)行復(fù)蘇、傳代等操作時對其密度需要注意；生長速度慢的細(xì)胞，譬如內(nèi)皮細(xì)胞，初始細(xì)胞密度略高一些，生長狀態(tài)會比較好；還有一些細(xì)胞生長速度比較快，如巨噬細(xì)胞或某些腫瘤細(xì)胞，初始細(xì)胞密度較低更有利于其狀態(tài)的調(diào)整。

 

      總     結(jié)      

通過培養(yǎng)箱內(nèi)實(shí)時活細(xì)胞分析，可以隨時間全自動跟蹤和量化細(xì)胞的生長，并且得到的結(jié)果是非?？尚诺?。整個動態(tài)監(jiān)測過程中的圖像采集是完全無標(biāo)記，對細(xì)胞低干擾的，從而有機(jī)會在細(xì)胞生長最適宜的環(huán)境下捕捉到完整的、動態(tài)的、長期的細(xì)胞生長變化過程。儀器軟件自帶智能AI分析功能，可以輸出細(xì)胞融合度、生長曲線、延時動態(tài)視頻等分析數(shù)據(jù)，給研究者提供最直觀的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果，呈現(xiàn)實(shí)驗(yàn)中的變化差異。