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  藥物篩選是現(xiàn)代藥物開(kāi)發(fā)流程中必不可少的一個(gè)步驟，通過(guò)規(guī)范化的實(shí)驗(yàn)手段從大量化合物或者新化合物中篩選出對(duì)某一特定作用靶點(diǎn)具有較高活性化合物的過(guò)程。藥物篩選從本質(zhì)上講就是對(duì)化合物進(jìn)行藥理活性實(shí)驗(yàn)，隨著藥物開(kāi)發(fā)技術(shù)的發(fā)展，對(duì)新化合物的生理活性實(shí)驗(yàn)從早期的驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)楹Y選性實(shí)驗(yàn)，即所謂的藥物篩選。

  藥物篩選中濃度摸索是確定藥物效用必不可少的一步。今天，小編用CELLImage Mini全自動(dòng)活細(xì)胞成像儀對(duì)不同濃度抗腫瘤藥針對(duì)不同細(xì)胞的作用做一個(gè)簡(jiǎn)單、方便、快捷的篩選實(shí)驗(yàn)。

 

    實(shí) 驗(yàn) 過(guò) 程    

細(xì)胞傳代當(dāng)日加藥

  ? 傳代鋪板：將A375細(xì)胞、B16細(xì)胞、HELA細(xì)胞分別傳代至24孔板中；

  ? 配制不同使用濃度的藥物：參考使用說(shuō)明，計(jì)算所需抗腫瘤藥物（5-fu）的用量，配制不同使用濃度的藥物；

  ? 按照二十四孔板每孔500μl 培養(yǎng)體系將不同濃度的5-Fu抗腫瘤藥物按對(duì)應(yīng)用量分別添加至三種細(xì)胞中。

 

 實(shí) 驗(yàn) 圖 像 采 集 

  用CELLImage Mini全自動(dòng)活細(xì)胞成像儀對(duì)加入了不同濃度抗腫瘤藥物的細(xì)胞進(jìn)行成像，間隔30min采集一張明場(chǎng)圖像，總時(shí)長(zhǎng)為72H。圖像及分析結(jié)果如下圖所示：

 

細(xì) 胞 一 ：A 3 7 5 細(xì) 胞

不同濃度及對(duì)照組各節(jié)點(diǎn)圖像一覽

 

不同濃度生長(zhǎng)曲線(xiàn)圖

在不同濃度的5-fu作用下，A375細(xì)胞隨著時(shí)間的增長(zhǎng)沒(méi)有明顯增殖，部分細(xì)胞出現(xiàn)調(diào)亡，濃度越高，細(xì)胞調(diào)亡越多。

 

細(xì) 胞 三 ：B 1 6 細(xì) 胞

不同濃度及對(duì)照組各節(jié)點(diǎn)圖像一覽

 

不同濃度生長(zhǎng)曲線(xiàn)圖

在不同濃度的5-fu作用下，B16細(xì)胞隨著時(shí)間的增長(zhǎng)沒(méi)有明顯增殖，部分細(xì)胞出現(xiàn)調(diào)亡，濃度越高，細(xì)胞調(diào)亡越多。

 

細(xì) 胞 三 ：H E L A 細(xì) 胞

不同濃度及對(duì)照組各節(jié)點(diǎn)圖像一覽

 

不同濃度生長(zhǎng)曲線(xiàn)圖

在不同濃度的5-fu作用下，HELA細(xì)胞隨著時(shí)間的增長(zhǎng)沒(méi)有明顯增殖，部分細(xì)胞出現(xiàn)調(diào)亡，濃度越高，細(xì)胞調(diào)亡越多。

 

    實(shí) 驗(yàn) 結(jié) 果    

  通過(guò)CELLImage Mini全自動(dòng)活細(xì)胞成像儀對(duì)藥物篩選實(shí)驗(yàn)進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的監(jiān)測(cè)及圖像采集，同時(shí)用自帶的Readcells軟件分析端對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析可以發(fā)現(xiàn)5-fu對(duì)三種腫瘤細(xì)胞存在不同程度的增殖抑制作用及殺傷作用，HALE細(xì)胞>B16細(xì)胞>A375細(xì)胞，且5-fu濃度越高，對(duì)細(xì)胞的增殖抑制作用及殺傷作用越顯著。

 

       總    結(jié)       

  CELLImage Mini全自動(dòng)活細(xì)胞成像儀，結(jié)合自帶分析軟件提供了一個(gè)靈活、可靠、快捷的監(jiān)測(cè)分析細(xì)胞動(dòng)態(tài)增殖調(diào)亡和藥物篩選的工具。實(shí)現(xiàn)了對(duì)不同種類(lèi)細(xì)胞的定量和可重復(fù)性分析，更重要的是，這種方法得到的結(jié)果是非常可信的，因?yàn)槿痰募?xì)胞實(shí)驗(yàn)圖像采集都是在培養(yǎng)箱里面進(jìn)行的，實(shí)驗(yàn)細(xì)胞一直處于最適宜的環(huán)境下，實(shí)現(xiàn)了在培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)干擾、長(zhǎng)時(shí)間、全自動(dòng)的動(dòng)態(tài)記錄細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的生長(zhǎng)變化過(guò)程。